Il patrono di Palestrina è sant'Agapito martire, venerato nella Cattedrale a lui dedicata: la festa in suo onore, la più importante della città, si svolge solitamente dal 17 al 19 agosto di ogni anno. Compatrona cittadina è santa Rosalia, festeggiata il 4 settembre.
Le varie celebrazioni religiose vanno di pari passo con lo svolgimento del Palio di Sant'Agapito, detto in dialetto «Lo palio»: una contesa fra i quattro rioni storici della città che, attraverso varie gare, si contendono il vessillo. La città conserva anche il Palazzo Colonna Barberini e la chiesa di Sant'Antonio Abate.