Le saint patron de Palestrina est saint Agapit martyr, vénéré dans la cathédrale qui lui est dédiée : la fête en son honneur, la plus importante de la ville, se déroule habituellement du 17 au 19 août de chaque année. La copatronne de la ville est sainte Rosalie, fêtée le 4 septembre.
Les diverses célébrations religieuses vont de pair avec le déroulement du Palio de Sant'Agapito, appelé en dialecte « Lo palio » : une compétition entre les quatre quartiers historiques de la ville, qui à travers diverses épreuves se disputent l'étendard. La ville conserve aussi le Palazzo Colonna Barberini et l'église Sant'Antonio Abate.