La patrona di Acquaviva delle Fonti è la Madonna di Costantinopoli, la cui festa patronale si svolge in quattro giorni culminando nel primo martedì di settembre. Compatroni cittadini sono sant'Eustachio, venerato nella Cattedrale a lui dedicata e festeggiato il primo martedì di marzo, e san Sebastiano, il 20 maggio.
Già a partire dalla settimana precedente la festa, l'immagine della Vergine viene portata in processione per sette giorni nelle sette parrocchie cittadine, in quella che è chiamata peregrinatio Mariae; la domenica mattina, dopo la celebrazione, si svolge il rito dell'Intronizzazione. La città conserva anche la chiesa di Santa Maria Maggiore e quella di Santa Lucia.